CS-804

Trombomodulina recombinante inhibe arterial proliferación celular del músculo liso inducida por la trombina.

Fuente

División de Cirugía Vascular del Departamento de Cirugía de la Universidad de Massachusetts Medical School, Worcester, 01655, EE.UU..

Abstracto

PROPÓSITO:

La reestenosis después de angioplastia o un injerto de bypass para restablecer la circulación a los órganos isquémicos es todavía un problema sin resolver. La trombina generada en concentraciones elevadas en los sitios de lesión vascular juega un papel central en la trombosis y hemostasis. alfa-trombina también se ha implicado como un mitógeno para células de músculo liso (SMC) proliferación que contribuye a la reestenosis arterial. La trombomodulina tiene una alta afinidad de unión con la trombina y la convierte trombina a partir de un procoagulante a un anticoagulante. Este estudio fue diseñado para examinar si la trombomodulina también podría atenuar la respuesta mediada por trombina SMC proliferativa.

MÉTODOS:

Porcino SMCs arteria carótida (pasajes 4-7) se sembraron en placas de 96 pocillos y se incubaron durante 3 días. Después de la detención del crecimiento en un definido medio libre de suero durante 2 a 3 días, SMCs se sometieron a los reactivos de la siguiente manera: (1) la alfa-trombina, (2) recombinante humana trombomodulina soluble que contiene un resto sulfato de condroitina, (3) la trombina péptido agonista del receptor (SFLLRNPNDKYEPF), y (4) alfa-trombina o trombina péptido agonista del receptor combinado con trombomodulina recombinante (RTM). La viabilidad y el estado de proliferación de SMCs se cuantificaron con MTT (azul tiazolilo) la función mitocondrial y bromodesoxiuridina (BrdU)-ADN ensayos de incorporación.

RESULTADOS:

Humano alfa-trombina aumento de la proliferación de SMC de una manera dependiente de la dosis en más de un 25% y 30% con trombina 1 U / ml a 3 U / ml en comparación con grupos de control en el día 7 (p <.006). RTM concentraciones de 0,5 microgramos / ml a 3 mg / mL no tienen ningún efecto significativo sobre el crecimiento de SMC. La estimulación de la proliferación de SMC inducida por alfa-trombina a 0,5 U / ml, 1 U / ml, y 2 U / mL fue significativamente inhibida con RTM a 2 mg / mL y como 3 microg / ml en los días 3, 7, y 10 evaluados con MTT ensayo (P <.01 a <.05) y BrdU-ADN ensayo de incorporación en el día 3 (p <.008). Receptor de trombina de péptido agonista aumentó SMC-BrdU incorporación del ADN a las 48 horas (p <.007), y su efecto no fue alterada por RTM.

CONCLUSIÓN:

RTM que contiene todos los dominios extracelulares de trombomodulina inhibe el efecto de la trombina sobre la proliferación de SMC in vitro. Debido a que la trombina es un mediador mitogénica de SMC en la lesión vascular, la inhibición de su función in vivo podría ayudar a prevenir la hiperplasia de SMC. El éxito de nuevos estudios in vivo puede llevar al uso de RTM para disminuir o prevenir la reestenosis arterial.

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